E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomiceto Phytophthora infestados (Mont) de Bary causa el tizón tardío, una peligrosa enfermedad de las patatas y los tomates. Una de las principales fuentes de inóculo primario. P. infestans son estructuras reproductoras en reposo de paredes gruesas: oosporas.
Las oosporas híbridas formadas como resultado del cruce de cepas parentales genéticamente diferentes contribuyen a un aumento de la diversidad genotípica en la población, como resultado de lo cual se acelera el proceso de adaptación de las cepas a nuevas variedades y fungicidas aplicados.
Formación de oosporas P. infestans en el campo se observó en muchos países del mundo: Rusia (Smirnov et al., 1999), Noruega (Hermansen et al., 2002), Suecia (Strömberg et al., 2001), Países Bajos (Kessel et al., 2002) y otros regiones. Las oosporas pueden sobrevivir durante más de 2 años en el suelo en un estado viable (Bødker et al., 2006) y causar infección de las plantas después de pasar el invierno (Ulanova et al., 2010; Lehtinen et al., 2002).
Anteriormente se demostró que las hojas de plantas de diferentes niveles del arbusto de papa tienen diferencias en la resistencia al tizón tardío; aumenta de las hojas inferiores a las superiores. Esta tendencia no depende de la edad de las hojas, la edad de la planta y la variedad de papa (Vesper et al., 2003). Al mismo tiempo, no pudimos encontrar datos sobre diferencias en la intensidad de la formación de oosporas en las hojas de diferentes capas del arbusto de papa en la literatura. Sin embargo, si existen tales diferencias, deben tenerse en cuenta al tomar muestras de hojas para el análisis de la formación de oosporas y al interpretar los resultados obtenidos por otros autores. El objetivo de este trabajo fue estudiar la formación de oosporas en las hojas desprendidas de diferentes capas de una planta de papa, colocadas en las mismas condiciones en cámaras húmedas.
materiales y métodos
Usamos 5 aislamientos P. infestans diferentes tipos de apareamiento aislados de muestras afectadas traídas de las regiones de Moscú, Riazán y Leningrado. De estos, se seleccionaron 3 pares de cepas de diferentes tipos de apareamiento, dando abundantes oosporas cuando se ensayaron en medio agar avena.
Para las pruebas, utilizamos plantas de papa libres de virus de las siguientes variedades cultivadas en un invernadero (en un sustrato de turba): Sandrin temprana, Zorachka, Uladar, Osiris, Ilyinsky mediados-temprano, Yanka a mitad de temporada.
Se seleccionaron hojas simples de diferentes niveles de la planta de papa para el análisis. Se seleccionaron tres hojas del nivel inferior (4 hojas compuestas inferiores), tres de la parte superior (3-4 hojas compuestas en la parte superior) y tres hojas del centro del arbusto. Se pesaron hojas simples, se fotografiaron en papel de coordenadas (para calcular el volumen y el área), y luego se colocaron boca abajo sobre la superficie de agua estéril, se vertieron 25 ml en placas Petri. Luego, cada hoja se infectó con una gota de una suspensión mixta de aislamientos de zoosporangia A1 y A2 del tipo de apareamiento. Para tres hojas recolectadas de cada nivel, se utilizó un inóculo de tres pares diferentes de aislamientos. Una hoja se infectó con una mezcla de inóculo de un par de aislados.
Para preparar una suspensión de zoosporangios, se cultivaron aislados de diferentes tipos de apareamiento en medio agar avena durante 7 días, después de lo cual se lavaron los zoosporangios con agua destilada estéril. La concentración de inóculo fue de 5-7 zoosporas en el campo de visión del microscopio con un aumento de 80x. Cada hoja se infectó con una gota de una suspensión mixta de aislamientos de zoosporangia del tipo de apareamiento A1 y A2.
En todos los experimentos, se utilizaron 3 hojas de papa por variante. Después de una incubación de 20 días a 18 ° C, cada hoja se homogeneizó en un mortero con 2 ml de agua destilada. De la suspensión resultante se tomaron 3 muestras, de las cuales se prepararon preparaciones para microscopía.
En cada variante, se examinaron 180 campos visuales, después de lo cual se recalculó el número de oosporas por 1 mm.2 superficie de la hoja. Se promediaron los resultados del recuento para cada variante.
Para calcular el intervalo de confianza (μ) para un nivel de significancia de 0,05, se utilizó la siguiente fórmula
donde s es la desviación estándar, n es el número de mediciones, t es la constante de la prueba t para un nivel de significancia de 0,05. Todos los cálculos se realizaron en Excel (paquete de Microsoft Office).
Resultados y discusión
La inoculación de hojas recolectadas de diferentes capas de un arbusto de papa y colocadas en las mismas condiciones en cámaras húmedas reveló diferencias en la intensidad de la formación de oosporas. En todas las variedades estudiadas, el número máximo de oosporas se formó tras la inoculación de hojas recolectadas de los niveles inferior y medio del arbusto. No se encontraron diferencias significativas en la formación de oosporas en las hojas inferiores y medias.
El número mínimo de oosporas se formó en las hojas de la capa superior (Fig. 1).
En las hojas de los niveles inferior y medio, el número máximo de oosporas se formó en las variedades Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar y Osiris. Se formaron de forma algo menos intensa en las hojas de la variedad Yanka. El número máximo de oosporas en las hojas de la capa superior se observó en las hojas de la variedad Uladar, luego Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin fueron en orden decreciente, pero no todas las diferencias fueron estadísticamente significativas.
Figura: 1. Formación de oosporas en las hojas de diferentes capas del arbusto de papa. Las inferiores son las hojas de los tres niveles inferiores del arbusto, las superiores son 3-4 hojas complejas de la parte superior de la planta, las del medio son del medio del arbusto.
Las barras de error muestran el intervalo de confianza para un nivel de significancia de 0,05.
En el campo, las condiciones microclimáticas también contribuyen a la formación de oosporas en las hojas inferiores y medias del arbusto: mayor humedad, menor insolación solar y fluctuaciones diarias de temperatura (Harrison, 1992). La pulverización superior da como resultado menos pesticidas en la parte inferior y central del arbusto. Para reducir la formación de oosporas, se deben utilizar tecnologías que permitan administrar fungicidas con éxito en las partes bajas y medias del arbusto. Se pueden obtener buenos resultados utilizando pulverizadores de aire turbulento y fungicidas sistémicos que pueden extenderse a las partes no tratadas del arbusto.
Este trabajo fue apoyado por la Russian Science Foundation (proyecto No. 14-50-00029).
El artículo fue publicado en la revista "Potato Protection" (No. 2, 2015)